제대(혈) 줄기세포
제대(탯줄, umbilical cord)란 엄마가 태아에게 성장에 필요한 모든 세포와 영양소를 공급하고 태아의 배설물을 배출하는 역할을 하는 기관인 태반에서 나와 엄마와 태아를 연결시키는 줄을 말한다. 제대는 태아의 배꼽과 태반을 연결한 가늘고 긴 띠모양의 줄로서 지름이 약 1cm, 길이 약 50cm의 크기로 두개의 제동맥(umbilical artery)과 한개의 제정맥(unbilical vein)으로 구성되어 있다. 제대혈이란 이 탯줄 안에 들어있는 혈액이다.
최근 제대혈에 혈액과 면역체계를 만들어 내는 줄기세포인 조혈모세포(hematopoietic stem cell)와 인체의 장기로 분화가 가능한 중간엽 줄기세포(mesenchymal stem cell)가 풍부하게 들어 있다는 것이 밝혀지면서 세포치료에 제대혈을 이용한 연구가 활발히 이루어지고 있다.
조혈모세포 이식 연구 현황
1988년 Fanconi 빈혈로 제대혈을 세계 최초로 이식받은 환아의 최근 성장 모습이다.
* 구홍회. 제23차 대한수혈학회 학술대회 발표 자료
제대혈에서 중간엽 줄기세포의 분리 및
분화 유도 연구
제대혈에서 간엽줄기세포를 분리하여 체외 배양하면서
골아세포, 연골세포, 지방세포로의 분화 유도 연구
A) 배양 9일째 골아세포로 분화 유도한 사진
B) Alizarin red 양성으로 mineralized matrix 형성 확인
C) von Kossa staining 양성
D) 골 특이 유전자 확인(hColl, hOSP, hOC, 분화 유도 3주 경과)
E) 분화 유도 21일째 면역형광 염색법으로 osteopontin 양성
E) 골아세포 분화 확인
F) Safranin-O stain으로 연골세포로의 분화 유도
G) 연골세포 특이 유전자 확인(hColl 1, hSDC, hPRLN, hAGCN)
H) Type II collagen staining 양성(면역조직화학염색법)
I) 위상차 현미경을 이용하여 lipid vacuole을 확인하여 지방세포로의 분화 확인
J) Oil-red O 양성으로 지방세포 확인
A) 신경계 세포로의 분화 유도(분화 유도 시작 후 10일 경과)
B) 신경계세포 특이 유전자 확인
C) MAP-2(Microtubule associate protein 2) 양성
D) GFAP(Glial fibrillary acidic protein) 양성
E) Calcium imaging assay
F) Ca++ ratio of change
G) 간세포(Hepatocyte)로 분화 유도
H) 간조직 특이 유전자 확인
I) 면역형광염색에 인 알부민 양성 확인
J) LDL uptake
제대(혈) 줄기세포
제대(탯줄, umbilical cord)란 엄마가 태아에게 성장에 필요한 모든 세포와 영양소를 공급하고 태아의 배설물을 배출하는 역할을 하는 기관인 태반에서 나와 엄마와 태아를 연결시키는 줄을 말한다. 제대는 태아의 배꼽과 태반을 연결한 가늘고 긴 띠모양의 줄로서 지름이 약 1cm, 길이 약 50cm의 크기로 두개의 제동맥(umbilical artery)과 한개의 제정맥(unbilical vein)으로 구성되어 있다. 제대혈이란 이 탯줄 안에 들어있는 혈액이다.
최근 제대혈에 혈액과 면역체계를 만들어 내는 줄기세포인 조혈모세포(hematopoietic stem cell)와 인체의 장기로 분화가 가능한 중간엽 줄기세포(mesenchymal stem cell)가 풍부하게 들어 있다는 것이 밝혀지면서 세포치료에 제대혈을 이용한 연구가 활발히 이루어지고 있다.
조혈모세포 이식 연구 현황
국내외에서 보고된 제대혈 조혈모세포의 이식 건수이다. (~2003)
* 구홍회. 제23차 대한수혈학회 학술대회 발표 자료
제대혈에서 중간엽 줄기세포의 분리 및 분화 유도 연구
제대혈에서 간엽줄기세포를 분리하여 체외 배양하면서
골아세포, 연골세포, 지방세포로의 분화 유도 연구
A) 배양 9일째 골아세포로 분화 유도한 사진
B) Alizarin red 양성으로 mineralized matrix 형성 확인
C) von Kossa staining 양성
D) 골 특이 유전자 확인(hColl, hOSP, hOC, 분화 유도 3주 경과)
E) 분화 유도 21일째 면역형광 염색법으로 osteopontin 양성
E) 골아세포 분화 확인
F) Safranin-O stain으로 연골세포로의 분화 유도
G) 연골세포 특이 유전자 확인(hColl 1, hSDC, hPRLN, hAGCN)
H) Type II collagen staining 양성(면역조직화학염색법)
I) 위상차 현미경을 이용하여 lipid vacuole을 확인하여 지방세포로의 분화 확인
J) Oil-red O 양성으로 지방세포 확인
A) 신경계 세포로의 분화 유도(분화 유도 시작 후 10일 경과)
B) 신경계세포 특이 유전자 확인
C) MAP-2(Microtubule associate protein 2) 양성
D) GFAP(Glial fibrillary acidic protein) 양성
E) Calcium imaging assay
F) Ca++ ratio of change
G) 간세포(Hepatocyte)로 분화 유도
H) 간조직 특이 유전자 확인
I) 면역형광염색에 인 알부민 양성 확인
J) LDL uptake
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